產品名稱：人膽脂瘤細胞
產品特點：人膽脂瘤細胞公司正在出售的產品獼猴肌肉細胞;MMm7 兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF 人肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1 GP2-293細胞，人胚腎上皮包裝細胞 大鼠腎小球系膜細胞,HBZY-1細胞 CL-0336FC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾))
產品型號：
更新日期：2024-12-19
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人膽脂瘤細胞的詳細資料：
細胞簡介：
膽脂瘤是一種良性鱗狀上皮角質化增生性病變，由鱗狀層狀角質化上皮細胞組成，它表現為一種含有成纖維細胞核炎性細胞的表皮囊腫，由囊內容物、基質、基質外層三部分構成。
其中，囊內容物是由分化的角化上皮組成，基質包括形成囊壁結構的角化鱗狀上皮，基質外層或固有層是膽脂瘤外周部分，由肉芽組成。中耳膽脂瘤具有過度增殖能力，炎癥可能是角質化細胞過度增殖的原因之一。
產品名稱 | 人膽脂瘤細胞 | 組織來源 | 膽脂瘤組織 |
英文名稱 | Primary human cholesteatoma cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞特性：
1）細胞來源于術后人的膽脂瘤組織。
2）細胞鑒定：廣譜角蛋白((Pan Cytokeratin)熒光染色為陽性。
3）經鑒定細胞純度高于90%。
4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5）細胞生長方式：上皮樣細胞，貼壁培養。
推薦培養基：
我們推薦使用 delf原代 腫瘤 細胞培養體系 作為該細胞的培養基。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
公司正在出售的產品：
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小鼠白介素 -7(mouse IL-7) 作用： ELISA 規格： 96T 美國 R&D
小鼠白介素 -10 (mouse IL-10) 作用： ELISA 規格： 96T 法國 Diaclone
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
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