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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔外周血淋巴細胞

英文名稱：Rabbit Peripheral Blood Lymphocyte Cells

組織來源：外周血

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔外周血淋巴分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細胞（lymphocyte）是白細胞的一種，是體積小的白細胞。其由淋巴器官產(chǎn)生，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中，是機體免疫應(yīng)答功能的重要細胞成分，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者，是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細胞變異的一線“士兵"。淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞系，按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T淋巴細胞（又名T細胞）、B淋巴細胞（又名B細胞）和自然殺傷（NK）細胞。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞，它們的初來源是相同的，都來自造血組織。T淋巴細胞隨血循環(huán)到，在激素等的作用下成熟，而B細胞在骨髓中分化成熟。當受抗原刺激后，T淋巴細胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細胞，再分化為致敏T淋巴細胞，參與細胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細胞與異體細胞等；而B淋巴細胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細胞，再分化為漿細胞，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體），參與體液免疫，其功能是產(chǎn)生抗體，提呈抗原，以及分泌細胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié)；NK細胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細胞毒效應(yīng)，具有殺傷靶細胞的作用。

實驗室分離的兔外周血淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×106cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔外周血淋巴經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：懸浮

細胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不增殖；不傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔外周血淋巴體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠結(jié)合珠蛋白(Hpt)檢測試劑盒 ，英文名： Hpt ELISA Kit

Mouse adiponectin (ADP) ELISA Kit 小鼠脂聯(lián)素(ADP)檢測試劑盒

Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFlt3ELISAKit大鼠FMS樣酪激酶3

細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)總活性熒光定量檢測試劑盒20次

Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

S100A6重組小鼠 S100A6 蛋白 Protein

CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原

HIST2H2BE重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein

IDH1 Protein Human 重組人 IDH1 蛋白

IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白

CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原

IDH1 Protein Human 重組人 IDH1 蛋白

S100A6重組小鼠 S100A6 蛋白 Protein

IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白

HIST2H2BE重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein

小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)檢測試劑盒

Humanadrenomedullin,ADMELISAKit 人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

humancoicoopieleasinghormone,CRH檢測試劑盒人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CHK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Humanproteinphosphatase1regulatorysubunitA,PPP1R1AELISAKit人蛋酸酶1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔外周血淋巴細胞兔I型膠原(rabbit Collagen I)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔II型膠原(rabbit Collagen II)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔II型膠原C端肽(rabbit CTX-II)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔D2聚體(rabbit 2-Dimer)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用