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細胞簡介：

大鼠主動脈平滑肌分離自主動脈組織；主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為：升主動脈起于左心室，至右側第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈，以上為胸主動脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈；髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象，探討心血管疾病相關發(fā)病機制是目前研究的熱點；體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠主動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠主動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

小鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒   小鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠單核細胞趨化蛋白4試劑盒、小鼠單核細胞趨化蛋白4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠酯轉移蛋白試劑盒   小鼠酯轉移蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠酯轉移蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠酯轉移蛋白試劑盒、小鼠酯轉移蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠膽囊收縮素試劑盒   小鼠膽囊收縮素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠膽囊收縮素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠膽囊收縮素試劑盒、小鼠膽囊收縮素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠二肽基肽酶試劑盒   小鼠二肽基肽酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠二肽基肽酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠二肽基肽酶試劑盒、小鼠二肽基肽酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

小鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai endomeial aibody (EMAb) ELISA Kit 大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)試劑盒

HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit 樣轉錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP試劑盒人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物活性線粒體分離試劑盒10次

Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit人α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CXCL13重組狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 Protein

N-ras 原癌基因抗原 0.5mgN-ras 原癌基因抗原

NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 194-413, His 標簽) Protein

EGFL6 Protein Human 重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白

FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標簽)

N-ras 原癌基因抗原 0.5mgN-ras 原癌基因抗原

EGFL6 Protein Human 重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白

CXCL13重組狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 Protein

FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標簽)

NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 194-413, His 標簽) Protein

大鼠主動脈平滑肌細胞大鼠粘蛋白1(MUC1)試劑盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit

Mouse lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒

MouseIerleukin1α,IL-1αELISAkit 小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit人胰高血糖素樣肽1

吸煙者人體肺組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

ELISAKitSDF-1β/CXCL12大鼠基質細胞衍生因子1β

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。