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產(chǎn)品名稱：大鼠直腸平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：大鼠直腸平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品GBC-SD(人膽囊癌細(xì)胞) SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 Hela/DDP細(xì)胞，Hela細(xì)胞耐藥亞株 人急性T淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞,MOLT-4細(xì)胞 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-
產(chǎn)品型號(hào)：
更新日期：2024-12-11
訪問次數(shù)：379
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠直腸平滑肌分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以門而終。直腸上端的大小似結(jié)腸，其下端擴(kuò)大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細(xì)接管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈，來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動(dòng)中基本的運(yùn)動(dòng)方式；腸炎時(shí)由于平滑肌特殊肌動(dòng)蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動(dòng)蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進(jìn)一步證明了炎癥時(shí)的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對(duì)平滑肌細(xì)胞的反應(yīng)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠直腸平滑肌細(xì)胞 | 組織來源 | 直腸組織 |
英文名稱 | Rat Rectal Smooth Muscle Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠直腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠直腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠Slit同源物3(Slit3)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： Slit3 ELISA Kit
Phenylalanine (LPA) ELISA Kit 人苯(LPA)檢測(cè)試劑盒
ChickenInsulin-likegrowthfactors1,IGF-1ELISAKit 雞胰島素樣生長因子1(IGF-1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforCCB(Mousecalciumchannelblockers)ELISAKit小鼠鈣通道阻滯劑
細(xì)菌DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒20次
RatAndrostenedione,ASDELISAKit大鼠雄烯二同(ASD)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
ACVR2B重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
角蛋白5(KRT5)重組蛋白 Recombinant Keratin 5 (KRT5)
HEXB重組人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 Protein
CD97 Protein Human 重組人 CD97 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
角蛋白5(KRT5)重組蛋白 Recombinant Keratin 5 (KRT5)
CD97 Protein Human 重組人 CD97 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ACVR2B重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
HEXB重組人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 Protein
小鼠纖連蛋白(FN)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat osteoprotegerin ligand (OPGL) ELISA Kit 大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)檢測(cè)試劑盒
Humandopaminedecarboxylase,DDCELISAKit 人多巴胺脫羧酶(DDC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenHeatShockProtein60,HSP-60檢測(cè)試劑盒雞熱休克蛋白60(Hsp-60)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CDK2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
MouseHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞小鼠血管緊張素Ⅱ 英文名稱： Angiotensin Ⅱ 規(guī)格： 英文縮寫： ANGⅡ
小鼠血管生成素-2 英文名稱： Angiopoietin-2 規(guī)格： 英文縮寫： ANG 2
小鼠心素 英文名稱： aialnaiureticpeptide 規(guī)格： 英文縮寫： ANP
小鼠凋亡誘導(dǎo)因子 英文名稱： apoptosis-inducing factor 規(guī)格： 英文縮寫： AIF
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