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產(chǎn)品名稱：大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基PADM CL-0302PA319(人大腸癌細(xì)胞) 支氣管上皮細(xì)胞生長添加物BEpiCGS Kyse510 人食管癌細(xì)胞 BIU-87/Adr
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-12-10
訪問次數(shù)：372
大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介：
大鼠角膜基質(zhì)分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分，占據(jù)角膜厚度的90%，由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整，透明度高的特點(diǎn)，正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分，維持角膜的透明度，此細(xì)胞對于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義。角膜基質(zhì)細(xì)胞，存在于角膜基質(zhì)層中，在正常情況下，處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時(shí)，不同上皮來源的因子及環(huán)境信號，將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng)，決定著角膜能否被修復(fù)。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞 | 組織來源 | 眼角膜組織 |
英文名稱 | Rat Corneal Stromal Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜基質(zhì)采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
直鏈淀粉 250mg
Amylose,fromPotato 1g
抗蛋白酶 250mg
Aipain,Dihydrochloride 1g
植物D(VD)ELISA 試劑盒
Human ai Golgi aibody (AGAA) ELISA Kit 人抗高爾基體抗體(AGAA)試劑盒
PorcineLeptin,LEPELISAKit 豬瘦素(LEP)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAFP(HumanAlpha-fetoprotein)ELISAKit人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白
血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性比色法定量試劑盒20次
Mousethrombieceptor,ELISAKit小鼠受體()試劑盒
REN重組小鼠 REN1 / Renin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD14(cluster of differentiation antigen 14 0.5mgCD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內(nèi)毒素受體抗原
NAMPT重組人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
ACYP2 Protein Human 重組人 ACYP2 / Acylphosphatase-2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD14(cluster of differentiation antigen 14 0.5mgCD14(cluster of differentiation antigen 14) CD14/內(nèi)毒素受體抗原
ACYP2 Protein Human 重組人 ACYP2 / Acylphosphatase-2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
REN重組小鼠 REN1 / Renin-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NAMPT重組人 PBEF / Visfatin / NAMPT 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
大鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA 試劑盒
Rat aquaporin 0 (AQP-0) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒
HumanPlacealalkalinepkosphatase,PLAPELISAKit 人胎盤堿性0酸酶(PLAP)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanchondroitinsulfate,CS試劑盒人軟骨素(CS)試劑盒
總?cè)樗岽郎y樣品處理試劑盒20次
HumanSc1-70Aibody,Sc1-70-AbELISAKit人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)試劑盒
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